怎么运用兔血清以及保存注意事项
兔血清的运用方法:
1、称取本品23.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,拌和加热煮沸至*溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、样品的稀释及处理,略。
3、依据商检的规范要求或对标本污染状况的估量,兔血清选择2—3个稀释度,分别在10倍递增稀释的一起,即以汲取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。
4、稀释液移入平皿后,应及时将凉至45℃的琼脂培养基(可放置于45℃水浴箱保温)注入平皿约15mL,并滚动平皿使混合均匀。一起将琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
5、待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。
6、调查成果并进行计数。25-250个菌落为适宜规模。
兔血清保存注意事项:
1、需求长期保存的兔血清有必要储存于-20℃ - 兔血清-70℃ 低温冰箱中,4℃冰箱中保存时间切勿超越1月,由于血清结冰时体积会添加约10%,因而,血清在冻入低温冰箱,有必要预留定体积空间,否则易产生污染或玻璃瓶冻裂。
2、瓶装血清冻结需选用逐步冻结法:-20℃ 至 -70℃ 兔血清低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天,然后移入室温,待悉数溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(当心勿形成气泡),使温度与兔血清成分均一,减少沉积的产生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻结,因温度改动太大,容易形成蛋白质凝集而呈现沉积。
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