标签：冻存液 华远化学 溶液 牛血清

　　华远带您了解：细胞冻存及冻存液的选择

　　在细胞培养过程中，也经常会对细胞进行冻存操作。细胞冻存通常是指将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。

　　如果在细胞培养的过程中出现以下几种情况可以考虑进行细胞冻存：

　　①需要保存一定量的细胞，防止现培养细胞污染或其他意外情况而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用;

　　②几乎所有细胞在培养传代的过程中发生一定程度的变异，为了保持细胞实验结果的前后一致，可将传代较少的细胞冻存，待到需要使用时再解冻培养再使用;

　　③需要寄赠、购买、运送和交换细胞的时候，将细胞冻存起来再进行这些操作比较方便;

　　④需要进行细胞建库，长时间大量的保存细胞，这里需要更加注意冻存细胞的代次。

　　细胞冷冻损伤有两种假说：冰晶损伤和溶液损伤假说。冰晶损伤认为，温度下降，细胞内外的水分结冰形成冰晶会导致细胞膜和细胞器损伤导致细胞死亡，溶液损伤认为温度下降，细胞外部水分结冰，从而细胞质会暴露在高溶质的的溶液中而收到损伤，而复温时大量水分会复温时，大量水分渗入细胞内会造成细胞死亡。

　　针对这两种假说，细胞冻存和复苏的基本原则是慢冻速融。现在市面上的细胞冻存液多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可以使细胞内的水分身处细胞外，减少细胞内冰晶的形成，进而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。而复苏细胞采取快速融化的方法也是为了保证细胞外的结晶在很短的时间内就可以融化。避免由于融化过慢导致的溶液损伤。

　　目前有两种细胞冻存液，分别是CellStore Freezing 哺乳动物细胞冻存液和Insect Cell Store Freezing 昆虫细胞冻存液。这两种细胞冻存液都是独特的细胞保护配方，在冻存过程中细胞可直接放入-70℃冰箱，无需程序降温盒或从4℃到-20℃到-70℃冰箱的繁琐程序降温。复苏方法同常规细胞冻存液，并且对于DMSO不敏感的细胞，复苏时无需去除细胞冻存液。

　　其中，哺乳动物细胞冻存液一种具有自主知识产权、独特配方的哺乳动物细胞冻存液，它还具有以下优点：

　　1)其化学组成明确，以DMEM为母液，不含牛血清或其他蛋白成分。

　　2)不含牛血清或其他蛋白成分，不引入造成细胞种子污染的外源因子，如各种牛源病毒和支原体等。

　　3)不含牛血清或其他蛋白成分，同样适用于无血清培养的细胞冻存。

　　4)不含牛血清或其他蛋白成分，非常适合用于冻存那些在使用常规含牛血清冻存液过程中容易聚团的细胞，如各种293细胞等。

　　5)可选包装设计为10mL×5的规格，无需再次分装，而且在使用过程中不易造成不同使用者或不同细胞间的交叉污染。

　　6)经过Hela、RD、HEK-293、293T、SP2/0、K562 和P815等多种细胞的测试，复苏后细胞存活率均高于用常规含牛血清冻存液。

　　华远带您了解：细胞冻存及冻存液的选择 华远公司主要业务为向大专院校、科研机构，药企、化工企业提供高品质、特殊规格的化学产品和技术解决方案，已经形成了累计服务超过1000家客户，提供高规格产品超过6000种，合作行业和产业伙伴超过1200家的体量和规模，积累了丰富的经验和良好的口碑。基于长期的行业经验和积累，我司已经形成了既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能适应企业从小试、中试到规模化等各个阶段的综合需求的核心能力。公司在技术理念、产品研发、产品合成、产品分析、质量检测、产品存储、产品包装等相关领域，都形成了相对成熟领先的自有体系。